RTPCR检测是检测COVID-19病毒最可靠的实验室方法。本文将讨论什么是RTPCR测试，它如何检测Covid-19冠状病毒，什么是CT值，其测试结果的意义以及该测试的优势。
什么是RTPCR检测
RTPCR Test代表逆转录聚合酶链反应试验也叫as实时PCR检测。这是检测和跟踪COVID-19病毒最可靠、最快速的实验室方法之一。该试验也用于该病毒的研究。该试验还用于埃博拉病毒和寨卡病毒的检测。
图1 - RTPCR检测简介
该测试主要检测致病微生物(也称为病原体或病毒)中特定遗传物质的存在。遗传物质要么是DNA(脱氧核糖核酸)或核糖核酸核糖核酸。Covid-19病毒仅含有RNA这种病毒的检测包括将RNA转化为DNA，也称为逆转录。
RTPCR检测包括利用逆转录酶(RT)酶逆转录RNA模板生成互补DNA (cDNA)。这种酶使用RNA模板产生互补的单链DNA，称为cDNA。
此外，DNA聚合酶将单链DNA分子转化为双链DNA，可以用作PCR反应的模板。这有助于利用引物和热循环以指数方式复制和扩增DNA。RTPCR值或简单的CT值有助于确定接受测试的人是否患有Covid-19病毒。
图2 - Covid-19可靠检测
COVID-19 RTPCR检测是如何工作的
RTPCR检测包括四个重要步骤。它们是:
- 样品收集
- 病毒灭活
- RNA的提取
- RTPCR测试
样品收集
这一步包括收集鼻拭子。这需要从鼻后和喉咙收集鼻或呼吸道分泌物的测试样本。这个样品送到实验室做进一步的检测。
病毒灭活
病毒灭活是抑制病毒复制和污染的重要步骤。这是通过加热、pH值处理、紫外线处理或溶剂/洗涤剂处理等改变病毒周围的环境来实现的。然后将失活的样品进行提取。
图3 -用于RTPCR检测的PCR机/热循环仪
RNA的提取
从灭活的生物样品中分离纯化RNA。这可以使用市售的RNA提取试剂盒或通过有机提取来完成。这个过程从样品中去除蛋白质、脂肪等。将得到的RNA样品储存在无RNA酶的水中。
RTPCR测试
RTPCR(逆转录聚合酶链反应)检测包括两个步骤:
- 反转录
- 聚合酶链反应
反转录
它包括使用特定的酶将RNA转化为互补DNA (cDNA)。逆转录酶是一种用于DNA分子合成的酶。这种DNA被称为互补DNA，在RTPCR测试中用作PCR测试的模板。
聚合酶链反应
这个过程包括将DNA序列扩增到数百万份拷贝，这是使用一种称为热循环器的设备完成的。将样品置于样品孔中，用卤钨灯照射。光在到达样品孔之前要通过五个激发滤光片。包括使用荧光实时检测和监测扩增过程。
荧光信号的强度与产生的DNA拷贝成正比。如果荧光强度超过一定的阈值，则测试确定为阳性。如果样品中不存在病毒，则RTPCR检测程序的PCR检测不会复制DNA，因此可以断定被测样品是否具有冠状病毒株。
图4 - RTPCR检测程序
什么是CT值
CT值或周期阈值是在测试样本中检测到病毒的速度的度量。CT (Cycle Threshold)值小于35可视为阳性，大于35可视为阴性。CT值等于35的样本，被认为是一个不好的s型曲线，基本上应该重新测试。
- CT值越低=病毒载量越高
- CT值越高=病毒载量越低
Covid-19 RTPCR检测结果意味着什么
无论患者是否呈阳性或阴性，RTPCR检测仅表明在检测时是否存在病毒。它既不排除患者过去是否受到感染并因此产生了免疫力，也不排除患者处于早期阶段并将在不久的将来出现症状。
Covid-19检测结果可能是:
- 积极的
- 负
积极的
如果一个人是Covid阳性，他可以在家中隔离，并在药物治疗下观察他/她的健康状况。如果情况变得严重，他可以去看医生或附近的医院。
负
如果一个人是Covid阴性，仍然建议戴上口罩保持社交距离，并留在家里保护自己和他人。
RTPCR检测的优势
其优点包括:
- 它是目前最可靠的检测技术。
- 微创检查。
- 结果是准确的。
- 避免了结转污染。
- 分析是快速和容易的。
RTPCR检测的缺点
缺点是:
- 有时，当被测试者患普通感冒时，这项测试会产生假阳性报告。
- 当人们被要求使用鼻拭子时，他们可能会感到不舒服。
- 样品必须纯净无污染，否则检测结果不准确。
还读:CRISPR基因编辑技术-它是如何工作的，使用和限制Tamilrockers网站2020 | Movierulz |他们如何工作|新链接(代理)，下载最新的电影如何在家里制作简单的逆变器-一步一步如何通过轴承编号识别轴承-计算和命名
